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黃曲霉毒素B1檢測卡原理及用途：黃曲霉毒素B1檢測卡應(yīng)用競爭抑制膠體金免疫層析的原理制成，用于檢測谷物、飼料等樣本中的黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1，AFB1）。

樣本溶液滴入檢測卡的加樣孔后，樣本溶液中的黃曲霉毒素B1與金標抗體相結(jié)合，從而阻止金標抗體與纖維素膜上黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物結(jié)合。當樣本溶液中的黃曲霉毒素B1含量大于檢測限時檢測線不顯色，結(jié)果為陽性；當樣本溶液中黃曲霉毒素B1含量小于檢測限時檢測線顯紫紅色，結(jié)果為陰性。

2 技術(shù)指標

2.1 試劑卡靈敏度：2ppb（ng/ml）

    對樣本的最終檢測限須以試劑卡靈敏度乘以樣本處理的稀釋比例。

2.2 樣本檢測下限：

谷物、飼料、糧油……………10ppb

谷物、飼料（須吹干）………5ppb

3 試劑盒組成

檢測卡…………………………50個/盒

說明書…………………………1份

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器：均質(zhì)器 、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl

4.3 試劑：甲醇，正己烷

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知：

實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結(jié)果。

5.2 配液：

配液1：樣本提取液

    70%甲醇，即V甲醇:V去離子水=7:3。

5.3 樣本前處理步驟：

5.3.1 谷物、飼料

1）稱取2g粉碎樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液

振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。

2）取0.1ml上清，加入0.4ml去離子水，混勻備用。

5.3.2谷物、飼料（須吹干）

 若要求檢測下限為5ppb時，可按如下操作：

1）稱取2g粉碎樣本于離心管中，加入4ml樣本提取液，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘；

2）取1ml上層液體在50-60℃條件下用氮氣或空氣吹干；

3）先加入0.25ml70%甲醇溶解剩下的殘留物，劇烈震蕩2分鐘；再加入1ml去離子水，混勻備用。（注意：這一步甲醇與水的加液順序不能顛倒）

         稀釋倍數(shù)：2.5倍     檢測下限：5ppb

5.3.3糧油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）

1）稱取2g樣本于離心管中，再根據(jù)不同的檢出限要求按下表加入樣本提取液

然后加入8ml正己烷，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘。

2）去除上層液體，取0.1ml下層液體加入0.4ml去離子水，混勻備用。

6 實驗步驟

6.1 撕開檢測卡鋁箔包裝袋，取出檢測卡，放于平整、潔凈的臺面上。

6.2 用配套吸管吸取已準備好的樣本液體，緩慢、逐滴的（應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生）滴加2-3滴（約60ul）到加樣孔（S）內(nèi)。

6.3 室溫下放置8-10分鐘判斷結(jié)果。

7 結(jié)果判斷

陰性：在檢測窗內(nèi)，檢測線（T）及對照線（C）同時出現(xiàn)紫紅色線。

陽性：在檢測窗內(nèi)，只有對照線（C）出現(xiàn)一條紫紅色線。

失效：在檢測窗內(nèi)，對照線（C）不出現(xiàn)紫紅色線。

8 注意事項

8.1 過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品，均不可使用。

8.2 檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復到室溫后打開，打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后失效。

8.3 不要觸摸檢測卡中央的白色膜面。

8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。

8.5 待檢樣本溶液需清亮、無混濁顆粒、無細菌污染，否則容易導致阻塞、顯色不明顯等異?，F(xiàn)象，從而影響實驗結(jié)果的判定。

9 貯藏及保存期

儲藏條件：試劑盒于2-30℃干燥環(huán)境下保存。

保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒。